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介绍牛血清白蛋白常见的问题解决方法
2022-01-21 牛血清白蛋白一般做为稳定剂被用于限制酶或者修饰酶的保存溶液和反应液中，因为有些酶在低浓度下不稳定或活性低。加入牛血清白蛋白后，它可能起到保护或载体作用，不少酶类添加牛血清白蛋白后能使其活性大幅度提高。对多数底物牛血清白蛋白而言，牛血清白蛋白可以使酶切更*，并可实现重复切割。在37℃，酶切反应超过1h时，牛血清白蛋白可以使酶更加稳定，因为在不含牛血清白蛋白的反应缓冲液中，许多限制性内切酶在37℃下只能存活10"20min甚至更短的时间。而BSA可以结合缓冲液或底物DNA中抑制限...
外泌体通过分子信息传递扮演着重要的角色
2022-01-07 外泌体作为疾病诊断标志物的潜在应用依赖于基于外泌体的药物递送系统的技术突破，要将其用于临床治疗，外泌体的大规模工业化生产面临很大的挑战。外泌体（exosome）是细胞分泌囊泡（extracellularvesicles）的一种亚型，存在于生物体液中，并参与多种生理和病理过程。外泌体被认为是细胞间通信的一种新机制，允许细胞交换蛋白质、脂质和遗传物质。过去，细胞分泌的外泌体一度被认为只是参与废物排泄；现在，随着高通量蛋白质组学和基因组学的发展，外泌体被广泛认为是生物体内细胞间短距...
介绍细胞凋亡形态学的几种检测方法
2021-11-28 细胞凋亡与坏死是两种*不同的细胞凋亡形式，根据死亡细胞在形态学、生物化学和分子生物学上的差别，可以将二者区别开来。细胞凋亡的检测方法有很多，下面介绍几种常用的测定方法。根据凋亡细胞固有的形态特征，人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法。1、光学显微镜和倒置显微镜（1）未染色细胞：凋亡细胞的体积变小、变形，细胞膜完整但出现发泡现象，细胞凋亡晚期可见凋亡小体。贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落。（2）染色细胞：常用姬姆萨染色、瑞氏染色等。凋亡细胞的染色质浓缩、边缘化，核膜裂解、...
外泌体的提取主要包括以下几种方式
2021-11-25 外泌体是指包含了复杂RNA和蛋白质的小膜泡(30-150nm)，现今，其特指直径在40-100nm的盘状囊泡。1983年，外泌体于绵羊网织红细胞中被发现，1987年Johnstone将其命名为“exosome”。多种细胞在正常及病理状态下均可分泌外泌体。其主要来源于细胞内溶酶体微粒内陷形成的多囊泡体，经多囊泡体外膜与细胞膜融合后释放到胞外基质中。所有培养的细胞类型均可分泌外泌体，且外泌体天然存在于体液中，包括血液、唾液、尿液、脑脊液和乳汁中。有关他们分泌和摄取及其组成、“运载...
蛋白酶K的配制标准及保存方法
2021-10-26 蛋白酶K广泛应用于分子生物学,药理学等科研方面.一种非特异性、枯草杆菌蛋白酶相关的丝氨酸蛋白酶,具有很高的比活性.一般储存在-20°C,避光防潮密闭干燥。蛋白酶Ｋ主要应用于基因检测中基因抽取，是检测试剂盒生产的重要原料，蛋白酶K产品由于在尿素和SDS中仍然具有降解天然蛋白质的能力，因而被广泛应用于制备脉冲电泳的染色体DNA，以及去除DNA和RNA中的核酸酶。现有基因抽提及检测试剂盒中均需配备该酶。蛋白酶K配制标准：20mg/ml蛋白酶K配制标准(proteinaseK)：将2...
使用CCK-8要注意的事项有哪些
2021-10-25 CellCountingKit-8（简称CCK8）试剂可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析。相信做细胞的同学对他都很熟悉，你确定你使用CCK-8试剂的方式是*正确的吗？使用CCK-8要注意的事项有哪些：1.酚红和血清对CCK8法的检测不会造成干扰，可以通过扣除空白孔中本底的吸光度而消去。2.CCK8可以检测大肠杆菌，但不能检测酵母细胞。在细胞增殖实验每次测定的过程中需要避免细菌污染，以免影响结果。3.当在培养箱内培养时，培养板最外一圈的孔最容易干燥挥发，由于体积不准确而增加误...
胎牛血清与新生牛血清在蛋白组成上的差异有哪些
2021-09-26 胎牛血清（FetalBovineSerum,FBS）是在屠宰怀孕母牛的时候，通过心脏穿刺采取胎牛血获取的血清，因其未与外界环境接触，所以血清内IgG等免疫因子相对含量较少，适合用于免疫类细胞的培养。胎牛血清与新生牛血清在蛋白组成上的差异还是很明显的。首先，胎牛血清总蛋白含量（g/dl）约为2%-4%,新生牛血清约为3.0%-5.0%,成牛血清则高达8%-10%.从蛋白含量上也可以初步判断一个血清是否为胎牛或新生牛血清，蛋白含量越高说明牛龄越大，目前检测蛋白含量是初步检测一项重...
常见的细胞转染技术可分为瞬时转染和稳定转染
2021-08-29 细胞转染是将外源性基因导入细胞内的一种专门技术。随着基因与蛋白功能研究的深入，转染目前已成为实验室工作中经常涉及的基本方法。常规转染技术可分为两大类,一类是瞬时转染,一类是稳定转染。前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色体中,因此一个宿主细胞中可存在多个拷贝数,产生高水平的表达,但通常只持续几天,多用于启动子和其它调控元件的分析。一般来说，超螺旋质粒DNA转染效率较高，在转染后24-72小时内（依赖于各种不同的构建）分析结果，常常用到一些报告系统如荧光蛋白，β半乳糖苷酶等来帮...

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